Biologie moléculaire

La biologie moléculaire / m ə ˈ l ɛ k j ʊ l ər / est la branche de la biologie qui cherche à comprendre la base moléculaire de l'activité biologique dans et entre les cellules , y compris la synthèse biomoléculaire , la modification, les mécanismes et les interactions. [1] [2] [3] L'étude de la structure chimique et physique des macromolécules biologiques est connue sous le nom de biologie moléculaire. [4]

La biologie moléculaire a d'abord été décrite comme une approche centrée sur les fondements des phénomènes biologiques - découvrant les structures des molécules biologiques ainsi que leurs interactions, et comment ces interactions expliquent les observations de la biologie classique. [5]

En 1945, le terme biologie moléculaire a été utilisé par le physicien William Astbury . En 1953, Francis Crick , James Watson , Rosalind Franklin et leurs collègues travaillant à l'unité du Conseil de la recherche médicale, laboratoire Cavendish, Cambridge (aujourd'hui le Laboratoire MRC de biologie moléculaire ), ont créé un modèle d' ADN à double hélice qui a changé tout le scénario de recherche. Ils ont proposé la structure de l'ADN basée sur des recherches antérieures effectuées par Rosalind Franklin et Maurice Wilkins . Cette recherche a ensuite conduit à trouver du matériel ADN dans d'autres micro-organismes, plantes et animaux. [4]

La biologie moléculaire n'est pas simplement l'étude des molécules biologiques et de leurs interactions ; il s'agit plutôt d'un ensemble de techniques développées depuis la genèse du domaine qui ont permis aux scientifiques d'en apprendre davantage sur les processus moléculaires. [6] De cette manière, il a à la fois complété et amélioré la biochimie et la génétique en tant que méthodes (de compréhension de la nature ) qui ont commencé avant son avènement. Une technique notable qui a révolutionné le domaine est la réaction en chaîne par polymérase (PCR), qui a été développée en 1983. [6] La PCR est une réaction qui amplifie de petites quantités d'ADN, et elle est utilisée dans de nombreuses applications dans toutes les disciplines scientifiques. [7] [8]

Le dogme central de la biologie moléculaire décrit le processus par lequel l'ADN est transcrit en ARN, qui est ensuite traduit en protéine. [2] [9]

La biologie moléculaire joue également un rôle essentiel dans la compréhension des structures, des fonctions et des contrôles internes au sein des cellules individuelles , qui peuvent toutes être utilisées pour cibler efficacement de nouveaux médicaments , diagnostiquer des maladies et mieux comprendre la physiologie cellulaire. [10] Certaines recherches cliniques et thérapies médicales issues de la biologie moléculaire sont couvertes par la thérapie génique , tandis que l'utilisation de la biologie moléculaire ou de la biologie cellulaire moléculaire en médecine est désormais appelée médecine moléculaire .

Histoire de la biologie moléculaire

Description de l'angle dans la structure de l'ADN
Représentation schématique de la structure de l'ADN de Watson et Crick

La biologie moléculaire se situe à l'intersection de la biochimie et de la génétique ; Au fur et à mesure de l'émergence et de l'évolution de ces disciplines scientifiques au 20ème siècle, il est devenu clair qu'elles cherchaient toutes deux à déterminer les mécanismes moléculaires qui sous-tendent les fonctions cellulaires vitales. [11] Les progrès de la biologie moléculaire ont été étroitement liés au développement de nouvelles technologies et à leur optimisation. [12] La biologie moléculaire a été élucidée par le travail de nombreux scientifiques, et ainsi l'histoire du domaine dépend de la compréhension de ces scientifiques et de leurs expériences. [ citation nécessaire ]

Le domaine de la génétique est né d'une tentative de comprendre les mécanismes moléculaires de l'héritage génétique et la structure d'un gène . Gregor Mendel a été le pionnier de ce travail en 1866, lorsqu'il a écrit pour la première fois les lois de l'héritage génétique sur la base de ses études sur les croisements d'accouplement dans les plants de pois. [13] Une telle loi de l'héritage génétique est la loi de ségrégation , qui stipule que les individus diploïdes avec deux allèles pour un gène particulier transmettront l'un de ces allèles à leur progéniture. [14] En raison de son travail critique, l'étude de l'héritage génétique est communément appelée génétique mendélienne . [15]

Une étape importante dans la biologie moléculaire a été la découverte de la structure de l'ADN . Ce travail a commencé en 1869 par Friedrich Miescher , un biochimiste suisse qui a proposé pour la première fois une structure appelée nucléine , que nous savons maintenant être (acide désoxyribonucléique), ou ADN. [16] Il a découvert cette substance unique en étudiant les composants des bandages remplis de pus et en notant les propriétés uniques des "substances contenant du phosphore". [17] Un autre contributeur notable au modèle d'ADN était Phoebus Levene , qui a proposé le "modèle de polynucléotide" d'ADN en 1919 à la suite de ses expériences biochimiques sur la levure. [18] En 1950, Erwin Chargaffdéveloppé le travail de Levene et élucidé quelques propriétés critiques des acides nucléiques : premièrement, la séquence des acides nucléiques varie selon les espèces. [19] Deuxièmement, la concentration totale de purines (adénine et guanine) est toujours égale à la concentration totale de pyrimidines (cystéine et thymine). [16] C'est maintenant connu comme la règle de Chargaff. En 1953, James Watson et Francis Crick ont ​​publié la structure en double hélice de l'ADN, [20] en utilisant le travail de cristallographie aux rayons X effectué par Rosalind Franklin et Maurice Wilkins. Watson et Crick ont ​​décrit la structure de l'ADN et ont émis des hypothèses sur les implications de cette structure unique pour les mécanismes possibles de réplication de l'ADN. [20]

Watson et Crick ont ​​​​reçu le prix Nobel de physiologie ou médecine en 1962, avec Wilkins, pour avoir proposé un modèle de la structure de l'ADN. [4]

En 1961, il a été démontré que lorsqu'un gène code pour une protéine , trois bases séquentielles de l'ADN d'un gène spécifient chaque acide aminé successif de la protéine. [21] Ainsi, le code génétique est un code triplet, où chaque triplet (appelé codon ) spécifie un acide aminé particulier. De plus, il a été montré que les codons ne se chevauchent pas dans la séquence d'ADN codant pour une protéine, et que chaque séquence est lue à partir d'un point de départ fixe. Entre 1962 et 1964, grâce à l'utilisation de mutants létaux conditionnels d'un virus bactérien [22] , des progrès fondamentaux ont été réalisés dans notre compréhension des fonctions et des interactions des protéines employées dans la machinerie deRéplication de l'ADN , réparation de l'ADN , recombinaison de l'ADN et assemblage de structures moléculaires. [ citation nécessaire ]

L'expérience de Griffith

Représentation schématique de l'expérience de Griffith

En 1928, Frederick Griffith , a découvert une propriété de virulence chez les bactéries pneumocoques, qui tuait des rats de laboratoire. Selon Mendel, répandu à cette époque, le transfert de gènes ne pouvait se produire que des cellules mères aux cellules filles. Griffith a avancé une autre théorie, déclarant que le transfert de gènes se produisant chez les membres de la même génération est connu sous le nom de transfert horizontal de gènes (HGT). Ce phénomène est maintenant appelé transformation génétique. [ citation nécessaire ]

L'expérience de Griffith portait sur la bactérie Streptococcus pneumoniae , qui avait deux souches différentes, une virulente et lisse et une avirulente et rugueuse. La souche lisse avait un aspect scintillant en raison de la présence d'un type de polysaccharide spécifique - un polymère de capsule de glucose et d'acide glucuronique. En raison de cette couche polysaccharidique de bactéries, le système immunitaire d'un hôte ne peut pas reconnaître les bactéries et tue l'hôte. L'autre souche, avirulente et rugueuse, est dépourvue de cette capsule polysaccharidique et a un aspect terne et rugueux. [ citation nécessaire ]

La présence ou l'absence de capsule dans la souche est connue pour être génétiquement déterminée. Les déformations lisses et rugueuses se produisent dans plusieurs types différents tels que SI, S-II, S-III, etc. et RI, R-II, R-III, etc. respectivement. Tous ces sous-types de bactéries S et R diffèrent les uns des autres par le type d'antigène qu'ils produisent. [4]

Expérience Hershey-Chase

La confirmation que l'ADN est le matériel génétique qui est la cause de l'infection est venue de l' expérience Hershey-Chase . Ils ont utilisé E. coli et un bactériophage pour l'expérience. Cette expérience est également connue sous le nom d'expérience de mélangeur, car le mélangeur de cuisine a été utilisé comme un appareil majeur. Alfred Hershey et Martha Chase ont démontré que l'ADN injecté par une particule de phage dans une bactérie contient toutes les informations nécessaires pour synthétiser les particules de phage descendant. Ils ont utilisé la radioactivité pour étiqueter l'enveloppe protéique du bactériophage avec du soufre radioactif et de l'ADN avec du phosphore radioactif, respectivement dans deux tubes à essai différents. Après avoir mélangé bactériophage et E.colidans le tube à essai, la période d'incubation commence au cours de laquelle le phage transforme le matériel génétique dans les cellules E. coli . Ensuite, le mélange est mélangé ou agité, ce qui sépare le phage des cellules E. coli . L'ensemble du mélange est centrifugé et le culot qui contient les cellules E. coli a été contrôlé et le surnageant a été jeté. Les cellules d'E. coli présentaient du phosphore radioactif, ce qui indiquait que le matériau transformé était de l'ADN et non l'enveloppe protéique.

L'ADN transformé s'attache à l'ADN d' E. coli et la radioactivité n'est visible que sur l'ADN du bactériophage. Cet ADN muté peut être transmis à la génération suivante et la théorie de la transduction est née. La transduction est un processus dans lequel l'ADN bactérien transporte le fragment de bactériophages et le transmet à la génération suivante. Il s'agit également d'un type de transfert horizontal de gènes. [4]

Biologie moléculaire moderne

Au début des années 2020, la biologie moléculaire est entrée dans un âge d'or défini par un développement technique à la fois vertical et horizontal. Verticalement, de nouvelles technologies permettent une surveillance en temps réel des processus biologiques au niveau atomique. [23] Les biologistes moléculaires ont aujourd'hui accès à des données de séquençage de plus en plus abordables à des profondeurs de plus en plus élevées, facilitant le développement de nouvelles méthodes de manipulation génétique dans de nouveaux organismes non modèles. De même, les biologistes moléculaires synthétiques piloteront la production industrielle de petites et macromolécules grâce à l'introduction de voies métaboliques exogènes dans diverses lignées cellulaires procaryotes et eucaryotes. [24]

Horizontalement, les données de séquençage deviennent plus abordables et utilisées dans de nombreux domaines scientifiques différents. Cela stimulera le développement des industries dans les pays en développement et augmentera l'accessibilité aux chercheurs individuels. De même, les expériences d'édition de gènes CRISPR-Cas9 peuvent désormais être conçues et mises en œuvre par des particuliers pour moins de 10 000 $ dans de nouveaux organismes, ce qui stimulera le développement d'applications industrielles et médicales. [25]

Relation avec d'autres sciences biologiques

Relation schématique entre biochimie , génétique et biologie moléculaire

La liste suivante décrit un point de vue sur les relations interdisciplinaires entre la biologie moléculaire et d'autres domaines connexes. [26]

Alors que les chercheurs pratiquent des techniques propres à la biologie moléculaire, il est courant de les combiner avec des méthodes issues de la génétique et de la biochimie . Une grande partie de la biologie moléculaire est quantitative et, récemment, une quantité importante de travaux a été effectuée à l'aide de techniques informatiques telles que la bioinformatique et la biologie computationnelle . La génétique moléculaire , l'étude de la structure et de la fonction des gènes, fait partie des sous-domaines les plus importants de la biologie moléculaire depuis le début des années 2000. D'autres branches de la biologie sont informées par la biologie moléculaire, soit en étudiant directement les interactions des molécules à part entière, comme en biologie cellulaire et en biologie du développement, ou indirectement, où les techniques moléculaires sont utilisées pour déduire les attributs historiques des populations ou des espèces , comme dans les domaines de la biologie évolutive tels que la génétique des populations et la phylogénétique . Il existe également une longue tradition d'étude des biomolécules "à partir de zéro", ou moléculairement, en biophysique . [29]

Techniques de biologie moléculaire

Animation ADN

Clonage moléculaire

Image de transduction

Le clonage moléculaire est utilisé pour isoler puis transférer une séquence d'ADN d'intérêt dans un vecteur plasmidique. [30] Cette technologie de l'ADN recombinant a été développée pour la première fois dans les années 1960. [31] Dans cette technique, une séquence d'ADN codant pour une protéine d'intérêt est clonée à l'aide de la réaction en chaîne par polymérase (PCR) et/ou d'enzymes de restriction , dans un plasmide ( vecteur d'expression ). Le vecteur plasmidique a généralement au moins 3 caractéristiques distinctives : une origine de réplication, un site de clonage multiple (MCS) et un marqueur sélectif (généralement une résistance aux antibiotiques ). De plus, en amont du MCS se trouvent lesles régions promotrices et le site d'initiation de la transcription , qui régulent l'expression du gène cloné.

Ce plasmide peut être inséré dans des cellules bactériennes ou animales. L'introduction d'ADN dans des cellules bactériennes peut se faire par transformation via l'absorption d'ADN nu, la conjugaison via un contact cellule-cellule ou par transduction via un vecteur viral. L'introduction d'ADN dans des cellules eucaryotes , telles que des cellules animales, par des moyens physiques ou chimiques est appelée transfection . Plusieurs techniques de transfection différentes sont disponibles, telles que la transfection au phosphate de calcium, l'électroporation , la microinjection et la transfection par liposomes . Le plasmide peut être intégré dans le génome, entraînant une transfection stable, ou peut rester indépendante du génome et exprimée temporairement, appelée transfection transitoire. [32] [33]

L'ADN codant pour une protéine d'intérêt se trouve maintenant à l'intérieur d'une cellule, et la protéine peut maintenant être exprimée. Une variété de systèmes, tels que des promoteurs inductibles et des facteurs de signalisation cellulaire spécifiques, sont disponibles pour aider à exprimer la protéine d'intérêt à des niveaux élevés. De grandes quantités d'une protéine peuvent alors être extraites de la cellule bactérienne ou eucaryote. La protéine peut être testée pour son activité enzymatique dans diverses situations, la protéine peut être cristallisée afin que sa structure tertiaire puisse être étudiée ou, dans l'industrie pharmaceutique, l'activité de nouveaux médicaments contre la protéine peut être étudiée. [34]

Réaction en chaîne par polymérase

La réaction en chaîne par polymérase (PCR) est une technique extrêmement polyvalente pour copier l'ADN. En bref, la PCR permet de copier ou de modifier une séquence d'ADN spécifique de manière prédéterminée. La réaction est extrêmement puissante et, dans des conditions parfaites, pourrait amplifier une molécule d'ADN pour devenir 1,07 milliard de molécules en moins de deux heures. La PCR a de nombreuses applications, notamment l'étude de l'expression génique, la détection de micro-organismes pathogènes, la détection de mutations génétiques et l'introduction de mutations dans l'ADN. [35] La technique PCR peut être utilisée pour introduire des sites d'enzymes de restriction aux extrémités des molécules d'ADN, ou pour faire muter des bases particulières d'ADN, cette dernière est une méthode appelée mutagenèse dirigée.. La PCR peut également être utilisée pour déterminer si un fragment d'ADN particulier se trouve dans une banque d'ADNc . La PCR a de nombreuses variantes, comme la PCR de transcription inverse ( RT-PCR ) pour l'amplification de l'ARN et, plus récemment, la PCR quantitative qui permet une mesure quantitative des molécules d'ADN ou d'ARN. [36] [37]

Gel d'agarose à deux pour cent dans un tampon borate coulé dans un plateau de gel

Électrophorèse sur gel

FDS-PAGE

L'électrophorèse sur gel est une technique qui sépare les molécules par leur taille à l'aide d'un gel d'agarose ou de polyacrylamide. [38] Cette technique est l'un des principaux outils de la biologie moléculaire. Le principe de base est que les fragments d'ADN peuvent être séparés en appliquant un courant électrique à travers le gel - parce que le squelette de l'ADN contient des groupes phosphate chargés négativement, l'ADN migrera à travers le gel d'agarose vers l'extrémité positive du courant. [38] Les protéines peuvent également être séparées sur la base de la taille à l'aide d'un gel SDS-PAGE , ou sur la base de la taille et de leur charge électrique en utilisant ce que l'on appelle une électrophorèse sur gel 2D . [39]

Protéines colorées sur un gel PAGE à l'aide d'un colorant bleu de Coomassie

Le dosage des protéines de Bradford

Le test de Bradford est une technique de biologie moléculaire qui permet la quantification rapide et précise des molécules de protéines en utilisant les propriétés uniques d'un colorant appelé Coomassie Brilliant Blue G-250. [40] Le bleu de Coomassie subit un changement de couleur visible du brun rougeâtre au bleu vif lors de la liaison aux protéines. [40] Dans son état cationique instable, le bleu de Coomassie a une longueur d'onde de fond de 465 nm et dégage une couleur brun rougeâtre. [41] Lorsque le bleu de Coomassie se lie à une protéine dans une solution acide, la longueur d'onde de fond passe à 595 nm et le colorant dégage une couleur bleu vif. [41]Les protéines du test se lient au bleu de Coomassie en environ 2 minutes et le complexe protéine-colorant est stable pendant environ une heure, bien qu'il soit recommandé que les lectures d'absorbance soient prises dans les 5 à 20 minutes suivant le début de la réaction. [40] La concentration de protéines dans le test de Bradford peut ensuite être mesurée à l'aide d'un spectrophotomètre à lumière visible et ne nécessite donc pas d'équipement important. [41]

Cette méthode a été développée en 1975 par Marion M. Bradford et a permis une quantification des protéines beaucoup plus rapide et plus précise par rapport aux méthodes précédentes : la procédure de Lowry et le dosage du biuret. [40] Contrairement aux méthodes précédentes, le test de Bradford n'est pas sensible aux interférences de plusieurs molécules non protéiques, notamment l'éthanol, le chlorure de sodium et le chlorure de magnésium. [40]  Cependant, il est susceptible d'être influencé par des agents tampons alcalins puissants, tels que le dodécylsulfate de sodium (SDS). [40]

Transfert et sondage de macromolécules

Les termes Northern , Western et Eastern blot sont dérivés de ce qui était initialement une blague de biologie moléculaire qui jouait sur le terme Southern blotting , d'après la technique décrite par Edwin Southern pour l'hybridation de l'ADN buvardé. Patricia Thomas, développeur du transfert d'ARN qui est ensuite devenu connu sous le nom de Northern blot , n'a en fait pas utilisé le terme. [42]

Southern Blot

Nommé d'après son inventeur, le biologiste Edwin Southern , le Southern blot est une méthode pour sonder la présence d'une séquence d'ADN spécifique dans un échantillon d'ADN. Les échantillons d'ADN avant ou après digestion par une enzyme de restriction (endonucléase de restriction) sont séparés par électrophorèse sur gel puis transférés sur une membrane par transfert par capillarité . La membrane est ensuite exposée à une sonde d'ADN marquée qui a une séquence de bases complémentaire à la séquence sur l'ADN d'intérêt. [43] Le transfert de Southern est moins couramment utilisé en science de laboratoire en raison de la capacité d'autres techniques, telles que la PCR, pour détecter des séquences d'ADN spécifiques à partir d'échantillons d'ADN. Cependant, ces transferts sont encore utilisés pour certaines applications, telles que la mesure du nombre de copies de transgènes chez des souris transgéniques ou dans l'ingénierie de lignées de cellules souches embryonnaires knock-out . [29]

Northern blot

Diagramme Northern blot

Le Northern blot est utilisé pour étudier la présence de molécules d'ARN spécifiques en tant que comparaison relative entre un ensemble d'échantillons différents d'ARN. Il s'agit essentiellement d'une combinaison d' électrophorèse sur gel d'ARN dénaturant et d'un transfert . Dans ce processus, l'ARN est séparé en fonction de la taille et est ensuite transféré sur une membrane qui est ensuite sondée avec un complément marquéd'une séquence d'intérêt. Les résultats peuvent être visualisés de différentes manières en fonction de l'étiquette utilisée ; cependant, la plupart aboutissent à la révélation de bandes représentant les tailles de l'ARN détecté dans l'échantillon. L'intensité de ces bandes est liée à la quantité d'ARN cible dans les échantillons analysés. La procédure est couramment utilisée pour étudier quand et combien d'expression génique se produit en mesurant la quantité de cet ARN présente dans différents échantillons, en supposant qu'aucune régulation post-transcriptionnelle ne se produit et que les niveaux d'ARNm reflètent des niveaux proportionnels de la protéine correspondante étant produit. C'est l'un des outils les plus élémentaires pour déterminer à quel moment et dans quelles conditions certains gènes sont exprimés dans les tissus vivants. [44] [45]

Western blot

Un western blot est une technique par laquelle des protéines spécifiques peuvent être détectées à partir d'un mélange de protéines. [46] Western blots peut être utilisé pour déterminer la taille des protéines isolées, ainsi que pour quantifier leur expression. [47] Dans le western blot , les protéines sont d'abord séparées par taille, dans un gel mince pris en sandwich entre deux plaques de verre dans une technique connue sous le nom de SDS-PAGE . Les protéines du gel sont ensuite transférées sur une membrane de polyfluorure de vinylidène (PVDF), de nitrocellulose, de nylon ou autre support. Cette membrane peut ensuite être sondée avec des solutions d' anticorps. Les anticorps qui se lient spécifiquement à la protéine d'intérêt peuvent ensuite être visualisés par diverses techniques, notamment les produits colorés, la chimiluminescence ou l'autoradiographie . Souvent, les anticorps sont marqués avec des enzymes. Lorsqu'un substrat chimioluminescent est exposé à l' enzyme , il permet la détection. L'utilisation des techniques de Western Blot permet non seulement la détection mais aussi l'analyse quantitative. Des méthodes analogues au transfert Western peuvent être utilisées pour colorer directement des protéines spécifiques dans des cellules vivantes ou des coupes de tissus . [46] [48]

Transfert oriental

La technique de transfert oriental est utilisée pour détecter la modification post-traductionnelle des protéines. Les protéines transférées sur la membrane de PVDF ou de nitrocellulose sont sondées pour des modifications à l'aide de substrats spécifiques. [49]

Microréseaux

Une puce à ADN en cours d'impression
Hybridation de la cible à la sonde

Une micropuce à ADN est une collection de points attachés à un support solide tel qu'une lame de microscope où chaque point contient un ou plusieurs fragments d' oligonucléotides d'ADN simple brin . Les matrices permettent de déposer de grandes quantités de très petits spots (100 micromètres de diamètre) sur une seule lame. Chaque spot a une molécule de fragment d'ADN qui est complémentaire d'une seule séquence d'ADN . Une variante de cette technique permet de qualifier l' expression génique d'un organisme à un stade particulier de son développement ( profilage d'expression ). Dans cette technique, l'ARN d'un tissu est isolé et converti en ADN complémentaire marqué(ADNc). Cet ADNc est ensuite hybridé aux fragments sur le réseau et la visualisation de l'hybridation peut être effectuée. Étant donné que plusieurs matrices peuvent être réalisées avec exactement la même position de fragments, elles sont particulièrement utiles pour comparer l'expression génique de deux tissus différents, tels qu'un tissu sain et cancéreux. En outre, on peut mesurer quels gènes sont exprimés et comment cette expression change avec le temps ou avec d'autres facteurs. Il existe de nombreuses façons de fabriquer des puces à ADN; les plus courants sont les puces de silicium, les lames de microscope avec des taches d'environ 100 micromètres de diamètre, les matrices personnalisées et les matrices avec des taches plus grandes sur des membranes poreuses (macroarrays). Il peut y avoir de 100 spots à plus de 10 000 sur un tableau donné. Les matrices peuvent également être constituées de molécules autres que l'ADN. [50] [51][52] [53]

Oligonucléotide spécifique d'allèle

L'oligonucléotide spécifique d'allèle (ASO) est une technique qui permet la détection de mutations d'une seule base sans nécessiter de PCR ou d'électrophorèse sur gel. Des sondes courtes (20 à 25 nucléotides de longueur) marquées sont exposées à l'ADN cible non fragmenté, l'hybridation se produit avec une spécificité élevée en raison de la courte longueur des sondes et même un seul changement de base entravera l'hybridation. L'ADN cible est ensuite lavé et les sondes marquées qui ne se sont pas hybridées sont éliminées. L'ADN cible est ensuite analysé pour la présence de la sonde par radioactivité ou fluorescence. Dans cette expérience, comme dans la plupart des techniques de biologie moléculaire, un contrôle doit être utilisé pour assurer une expérimentation réussie. [54] [55]

En biologie moléculaire, les procédures et les technologies sont continuellement développées et les technologies plus anciennes abandonnées. Par exemple, avant l'avènement de l'électrophorèse sur gel d'ADN ( agarose ou polyacrylamide ), la taille des molécules d'ADN était généralement déterminée par la vitesse de sédimentation dans des gradients de saccharose , une technique lente et laborieuse nécessitant une instrumentation coûteuse ; avant les gradients de saccharose, la viscosimétrie a été utilisée. Outre leur intérêt historique, il est souvent utile de connaître les technologies plus anciennes, car elles sont parfois utiles pour résoudre un autre problème nouveau pour lequel la technique la plus récente est inappropriée. [56]

Voir également

Les références

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Lectures complémentaires

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  • Rodgers M (juin 1975). "Le congrès de la boîte de Pandore". Pierre roulante . Vol. 189. p. 37–77.
  • Roberts K, Raff M, Alberts B, Walter P, Lewis J, Johnson A (2002). Biologie Moléculaire de la Cellule. Science des guirlandes. ISBN 978-0-8153-3218-3.

Liens externes

  • Médias liés à la biologie moléculaire sur Wikimedia Commons
  • Biochimie et biologie moléculaire à Curlie